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液相色譜儀相關知識之塔板理論

更新時間:2011-04-20      點擊次數(shù):3565

一、塔板理論的基本假設  
       塔板理論是Martin和Synger首先提出的色譜熱力學平衡理論。它把色譜柱看作分餾塔,把組分在色譜柱內(nèi)的分離過程看成在分餾塔中的分餾過程,即組分在塔板間隔內(nèi)的分配平衡過程。塔板理論的基本假設為: 
1)色譜柱內(nèi)存在許多塔板,組分在塔板間隔(即塔板高度)內(nèi)*服從分配定律,并很快達到分配平衡。 
2)樣品加在第0號塔板上,樣品沿色譜柱軸方向的擴散可以忽略。 
3)流動相在色譜柱內(nèi)間歇式流動,每次進入一個塔板體積。 
4)在所有塔板上分配系數(shù)相等,與組分的量無關。 
   雖然以上假設與實際色譜過程不符,如色譜過程是一個動態(tài)過程,很難達到分配平衡;組分沿色譜柱軸方向的擴散是不可避免的。但是塔板理論導出了色譜流出曲線方程,成功地解釋了流出曲線的形狀、濃度極大點的位置,能夠評價色譜柱柱效。 

二、色譜流出曲線方程及定量參數(shù)(峰高h和峰面積A) 
       根據(jù)塔板理論,流出曲線可用下述正態(tài)分布方程來描述; 
C=e或C=e 
由色譜流出曲線方程可知;當t=tR時,濃度C有極大值,Cmax=.Cmax就是色譜峰的峰高。
因此上式說明;①當實驗條件一定時(即σ一定),峰高h與組分的量C0(進樣量)成正比,所以正常峰的峰高可用于定量分析。 
②當進樣量一定時,σ越小(柱效越高),峰高越高,因此提高柱效能提高HPLC分析的靈敏度。 
由曲線方程對V(0~∞)求積分,即得出色譜峰面積A=×σ×Cmax=C0。可見A相當于組分進樣量C0,因此是常用的定量參數(shù)。把Cmax=h和Wh/2=2.355σ代入上式,即得A=1.064×Wh/2×h,此為正常峰的峰面積計算公式。


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